GB4789.5-2012食品安全國家標準食品微生物學檢驗志賀氏菌檢驗內容是什么?百檢網檢測范圍廣泛,可根據客戶需求選擇合適的檢測標準及項目安排檢測,全國近千家合作實驗室,CMA/CNAS資質齊全,可就近安排寄樣檢測。今天百檢網就給大家簡單介紹一下GB4789.5-2012食品安全國家標準食品微生物學檢驗志賀氏菌檢驗標準內容。
1.范圍
本標準規定了食品中志賀氏菌( Shigella)的檢驗方法。
本標準適用于食品中志賀氏菌的檢驗。
2.設備和材料
除微生物實驗室常規滅菌及培養設備外,其他設備和材料如下:
a) 恒溫培養箱:36℃±1;
b) 冰箱:2℃~5℃;
c) 膜過濾系統;
d) 厭氧培養裝置:41.5℃±1℃;
e) 電子天平:感量0.1g;
f) 顯微鏡:10×~100×;
g) 均質器;
h) 振蕩器;
i) 無菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1m刻度)或微量移液器及吸頭;
j) 無菌均質杯或無菌均質袋:容量500mL;
k) 無菌培養皿:直徑90mm;
l) pH計或pH比色管或精密pH試紙;
m) 全自動微生物生化鑒定系統。
3.培養基和試劑
3.1 志賀氏菌增菌肉湯-新生霉素:見附錄A中A.1。
3.2 麥康凱(MAC)瓊脂:見附錄A中A.2。
3.3 木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽(XLD)瓊脂:見附錄A中A.3。
3.4 志賀氏菌顯色培養基。
3.5 三糖鐵(TSI)瓊脂:見附錄A中A4。
3.6 營養瓊脂斜面:見附錄A中A.5。
3.7 半固體瓊脂:見附錄A中A6。
3.8 葡萄糖銨培養基:見附錄A中A.7
3.9 尿素瓊脂:見附錄A中A8。
3.10 β-半乳糖苷酶培養基:見附錄A中A.9
3.11 氨基酸脫羧酶試驗培養基:見附錄A中A.10。
3.12 糖發酵管:見附錄A中A.1l。
3.13 西蒙氏檸檬酸鹽培養基:見附錄A中A.12。
3.14 粘液酸鹽培養基:見附錄A中A.13。
3.15 蛋白胨水、靛基質試劑:見附錄A中A.14。
3.16 志賀氏菌屬診斷血清。
3.17 生化鑒定試劑盒。
4.檢驗程序
志賀氏菌檢驗程序見圖1。
5.操作步驟
5.1 增菌
以無菌操作取檢樣25g(nL),加入裝有滅菌225mL志賀氏菌增菌肉湯的均質杯,用旋轉刀片式均質器以8000r/min~10000rmin均質;或加入裝有225mL志賀氏菌增菌肉湯的均質袋中,用拍擊式均質器連續均質lmin~2min,液體樣品振蕩混勻即可。于41.5℃±1℃,厭氧培養16h~20h。
5.2 分離
取增菌后的志賀氏増菌液分別劃線接種于XLD瓊脂平板和MAC瓊脂平板或志賀氏菌顯色培養基平板上,于36℃±1℃培養20h~24h,觀察各個平板上生長的菌落形態。宋內氏志賀氏菌的單個菌落直徑大于其他志賀氏菌。若岀現的菌落不典型或菌落較小不易觀察,則繼續培養至48h再進行觀察。志賀氏菌在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征見表1。
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