GB5413.11-2010嬰幼兒食品和乳品中維生素B1的測(cè)定內(nèi)容是什么?百檢網(wǎng)檢測(cè)范圍廣泛，可根據(jù)客戶需求選擇合適的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)及項(xiàng)目安排檢測(cè)，全國近千家合作實(shí)驗(yàn)室，CMA/CNAS資質(zhì)齊全，可就近安排寄樣檢測(cè)。今天百檢網(wǎng)就給大家簡(jiǎn)單介紹一下GB5413.11-2010嬰幼兒食品和乳品中維生素B1的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容。

1.范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中維生素B1的測(cè)定方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中維生素B1的測(cè)定。

2.規(guī)范性引用文件

本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

3.原理

樣品在稀鹽酸環(huán)境中恒溫水解,酶解,樣液用堿性鐵氰化鉀衍生,正丁醇(或異丁醇)萃取后,經(jīng)C18反相色譜柱分離,用熒光檢測(cè)器(Ex:375mm,Em:435nm)檢測(cè),外標(biāo)法定量。

4.試劑和材料

除非另有規(guī)定,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。

4.1 正丁醇或異丁醇。

4.2 鐵氰化鉀。

4.3 氫氧化鈉。

4.4 濃鹽酸。

4.5 三水乙酸鈉。

4.6 冰乙酸。

4.7 甲醇:色譜純。

4.8 維生素B1標(biāo)準(zhǔn)品:硫胺素鹽酸鹽或硫胺素硝酸鹽,純度≥99%。

4.9 鐵氰化鉀溶液(20g/L):稱取2g鐵氰化鉀(4.2),用水溶解并定容至100mL。臨用前配制。

4.10 氫氧化鈉溶液(100g/L):稱取25g氫氧化鈉(4.3),用水溶解并定容至250mL。

4.11 堿性鐵氰化鉀溶液:將5mL鐵氰化鉀溶液(4.9)與200mL氫氧化鈉溶液(4.10)混合。臨用前配制。

4.12 鹽酸(0.1mol/L):吸取9mL濃鹽酸(4.4),溶于1000mL水中。

4.13 鹽酸(0.01mol/L):吸取0.1mol/L鹽酸(4.12)50mL,用水稀釋并定容至500mL。

4.14 乙酸鈉溶液(0.05mol/L):稱取6.80g三水乙酸鈉(4.5),加900mL水溶解,用冰乙酸(4.6)調(diào)pH值至4.0～5.0,定容至1000mL。經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾。

4.15 乙酸鈉溶液(2.0mol/L):稱取27.22g三水乙酸鈉(4.5),用水溶解并定容至100mL。

4.16 混合酶溶液,稱取2.345g木瓜蛋白酶(活力單位≥600U/g)、1.175g淀粉酶(活力單位≥4000U/g),用水溶解并定容至50mL。臨用前配制。

4.17 標(biāo)準(zhǔn)溶液

4.17.1 維生素B1標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(500μg/mL):稱取相當(dāng)于硫胺素50mg(*至0.1mg)的維生素B1標(biāo)準(zhǔn)品(4.8),用0.01mol/L鹽酸(4.13)溶解并定容于100mL。置于0℃~4℃冰箱中,保存期為3個(gè)月。

4.17.2 維生素B1標(biāo)準(zhǔn)中間液:準(zhǔn)確吸取200mL標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(4.17.1),用水稀釋并定容至100mL,此溶液中維生素B1濃度為10μg/mL。臨用前配制。

4.17.3 維生素B1標(biāo)準(zhǔn)工作液:分別吸取維生素B1標(biāo)準(zhǔn)中間液(4.17.2)0mL、0.50mL、1.00mL、2.00mL、5.00mL、10.00mL,用水溶解并定容至100mL。該標(biāo)準(zhǔn)系列濃度分別為0μg/mL、0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.5μg/mL、1.00μg/mL。臨用前配制。

5.儀器和設(shè)備

5.1 高效液相色譜儀,帶有熒光檢測(cè)器。

5.2 高壓滅菌鍋。

5.3 離心機(jī):轉(zhuǎn)速≥4000轉(zhuǎn)/分鐘。

5.4 pH計(jì):精度0.01。

5.5 組織搗碎機(jī)(轉(zhuǎn)速在0轉(zhuǎn)/分鐘～12000轉(zhuǎn)/分鐘可調(diào))。

5.6 0.45μm微孔有機(jī)濾膜。

5.7 天平:感量為0.001g和0.0001g。

6.分析步驟

6.1 試樣的處理

6.1.1 試液提取

稱取5g～10g(*至0.01g)試樣(如有必要,將試樣放入搗碎機(jī)中搗碎;試樣中含維生素B15μg以上)于100mL三角瓶中,加60mL0.1mol/L鹽酸(4.12),充分搖勻,用棉花塞和牛皮紙封口,放入高壓滅菌鍋內(nèi),在121℃下保持30min,待冷卻至40℃以下后取出,輕搖數(shù)次;用2.0mol/L乙酸鈉溶液(4.15)調(diào)pH值至4.0左右,加入2.0mL(可根據(jù)酶活力不同適當(dāng)調(diào)整用量)混合酶液(4.16),搖勻后,置于37℃的培養(yǎng)箱中過夜;將酶解液轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中,用水定容至刻度,濾紙過濾,取濾液備用。

6.1.2 試液衍生化

取上述濾液1000mL于25mL具塞比色管中,加入5mL堿性鐵氰化鉀(4.1),充分混勻后,加10.00mL正丁醇(或異丁醇)(4.1),強(qiáng)烈振蕩后靜置約10min,充分分層,吸取正丁醇(或異丁醇)相(上層)于4000轉(zhuǎn)/分鐘～6000轉(zhuǎn)/分鐘離心5min,取上清液經(jīng)有機(jī)微孔濾膜過濾(5.6),供進(jìn)樣用。

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