GB5413.15-2010嬰幼兒食品和乳品中煙酸和煙酰胺的測定內容是什么?百檢網檢測范圍廣泛,可根據客戶需求選擇合適的檢測標準及項目安排檢測,全國近千家合作實驗室,CMA/CNAS資質齊全,可就近安排寄樣檢測。今天百檢網就給大家簡單介紹一下GB5413.15-2010嬰幼兒食品和乳品中煙酸和煙酰胺的測定標準內容。
1.范圍
本標準規定了嬰幼兒食品和乳品中煙酸和煙酰胺的測定方法。
本標準適用于嬰幼兒食品和乳品中煙酸和煙酰胺的測定。
2.規范性引用性文件
本標準中引用的文件對于本標準的應用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅所注日期的版本適用于本標準。凡是不注日期的引用文件,其*新版本(包括所有的修改單)適用于本標準。
*法 高效液相色譜法
3.原理
試樣經熱水提取、酸性沉淀蛋白質后,以C18色譜柱分離,用紫外檢測器定量。
4.試劑和材料
除非另有規定,本方法所用試劑均為分析純,水為GB/T 6682規定的一級水。
4.1 淀粉酶:酶活力≥1.5U/mg。
4.2 鹽酸。
4.3 氫氧化鈉。
4.4 鹽酸(2.4mol/L):準確移取10mL鹽酸(4.2)于50mL容量瓶中,用水定容。
4.5 氫氧化鈉溶液(2.5mol/L):稱取5.0g氫氧化鈉(4.3)于50mL容量瓶中,用水定容。
4.6 高氯酸(HClO4):體積分數為60%。
4.7 甲醇(CH4O):色譜純。
4.8 異丙醇(C3H8O):色譜純。
4.9 庚烷磺酸鈉(C7H15NaO3S):優級純。
4.10 標準溶液
4.10.1 煙酸及煙酰胺標準儲備液(1.0mg/mL):稱取煙酸及煙酰胺標準品各0.1g(*到0.0001g,分別置于100mL容量瓶中,用水溶解定容。
4.10.2 煙酸及煙酰胺混合標準中間液(40μg/mL):分別準確吸取煙酸及煙酰胺標準儲備液(4.10.1)2mL至50mL定量瓶中,用水定容。臨用前配制。
4.10.3 煙酸及煙酰胺混合標準系列測定液:分別準確吸取煙酸及煙酰胺混合標準中間液(4.10.2)0.0mL、1.0mL、2.0mL、5.0mL、10.0mL,至50mL容量瓶中用水定容。該標準系列濃度分別為0.00μg/mL、0.80μg/mL、1.60μg/mL、4.00μg/mL、8.00μg/mL。臨用前配制。
5.儀器和設備
5.1 高效液相色譜儀,帶紫外檢測器。
5.2 pH計:精度為0.01。
5.3 超聲波振蕩器。
5.4 天平:感量為0.1mg。
5.5 培養箱:30℃~80℃。
6.分析步驟
6.1 試樣的預處理
6.1.1 含淀粉的試樣:稱取混合均勻固體試樣約5.0g(*到0.0001g)加入約25mL45℃~50℃的水,或稱取混合均勻液體試樣約20.0g(*到0.0001g)于150mL錐形瓶中,再加入約0.5g淀粉酶(4.1),搖勻后向錐形瓶中充氮,蓋上瓶塞,置于50℃~60℃的培養箱內培養約30min,取岀冷卻至室溫。
6.1.2 不含淀粉的試樣:稱取混合均勻固體試樣約5.0g(*到0.0001g)加入約25mL45℃~50℃的水,或稱取混合均勻液體試樣約20.0g(*到0.0001g)于150mL錐形瓶中,振搖,靜置5min~10min,充分溶解,并冷卻至室溫。
6.1.3 提取:將上述錐形瓶置于超聲波振蕩器中振蕩約10min。
6.1.4 沉淀及定容:待試樣溶液降至室溫后,用鹽酸(4.4)調節試樣溶液的pH值至1.7±0.1,放置約2min后,再用氫氧化鈉溶液(4.5)調節試樣溶液的pH值至4.5±0.1。將試樣溶液轉至50mL容量瓶中,用水反復沖洗錐形瓶,洗液合并于50mL容量瓶中,用水定容至刻度,混勻后經濾紙過濾,濾液再經0.45μm微孔濾膜加壓過濾,用試管收集,即為試樣待測液。
6.2 參考色譜條件
色譜柱:C8柱(粒徑5μm,150mm×4.6mm)或具有同等性能的色譜柱。
流動相:甲醇(4.7)70m,異丙醇(4.8)20mL,庚烷磺酸鈉(4.9)1g,用9l0mL水溶解并混勻后,用高氯酸(4.6)調pH至2.1±0.1,經0.45μm膜過濾。
流速:10mL/min。
檢測波長:261nm。
柱溫:25℃。
進樣量:10uL。
6.3 定量分析
6.3.1 標準曲線繪制
將煙酸及煙酰胺混合標準系列測定液(4.10.3)依次進行色譜測定(其標準樣品色譜圖參見附錄A中圖A.1.1)。記錄各組分的色譜峰面積或峰髙,以峰面積或峰髙為縱坐標,以標準測定液的濃度為橫坐標,繪制標準曲線。
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